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722分光光度計用法的基本原理是溶液中的物質(zhì)在光的照射激發(fā)下，產(chǎn)生了對光吸收的效應(yīng)，物質(zhì)對光的吸收是具有選擇性的，各種不同的物質(zhì)都具有其各自的吸收光譜，因此當(dāng)某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系，也即符合于比色原理---比耳定律。本儀器是可見光分光光度計，其波長范圍為360 nm～800 nm，具有測量被測溶液透光率（T）值，吸光度（A），濃度直讀，模擬信號輸出等功能。分光光度技術(shù)主要是利用物質(zhì)*的吸收光譜來鑒定物質(zhì)性質(zhì)及含量的技術(shù)，其理論依據(jù)是Lambert和Beer定律。使用方法：
（1）儀器預(yù)熱。打開樣品室蓋（光門自動關(guān)閉）。開啟電源，指示燈亮，儀器預(yù)熱20 min。選擇開關(guān)置于“T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”。
（2）旋動波長手輪，把所需波長對準(zhǔn)刻度線。
（3）將裝有溶液的比色皿放置比色架中，令參比溶液置于光路。
（4）蓋上樣品室蓋，調(diào)節(jié)透光率“100％T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0T”。（如顯示不到100％T，則可加按一次。
可見分光光度計原理（5）吸光度A的測量：儀器調(diào)T為0和100％后，將選擇開關(guān)轉(zhuǎn)換至A調(diào)零旋鈕，數(shù)字顯示應(yīng)為“.000”。然后拉出拉桿，使被測溶液置入光路，數(shù)字顯示值即為試樣的吸光度A。
（6）測定完畢后，先打開樣品室蓋，再斷電源。比色杯應(yīng)清洗干凈后，再貯放保存。
（7）濃度直讀按MODE鍵，使CONC批示燈亮，交已標(biāo)定濃度的溶液移入光路，按下溶液調(diào)節(jié)鍵（↑100％T鍵的↓0％鍵），使數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測溶液移入光路，即讀出相應(yīng)濃度值。
（8）儀器數(shù)字顯示背后，裝有接線柱，按下FUNC鍵，可輸出模擬信號
722型分光光度計使用說明:
722型分光光度計的使用方法操作方法
（1）將靈敏度旋鈕調(diào)整"1"檔（放大倍率zui小）。
（2）開啟電源，指示燈亮，儀器預(yù)熱20分鐘，選擇開關(guān)置于"T"
（3）打開試樣室蓋（光門自動關(guān)閉），調(diào)節(jié)"0%T"旋鈕，使數(shù)字顯示為"00.0"。
（4）將裝有溶液的比色皿放置比色架中。
（5）旋動儀器波長手輪，把測試所需的波長調(diào)節(jié)至刻度線處。
（6） 蓋上樣品室蓋，將參比溶液比色皿置于光路，調(diào)節(jié)透過率"100%T"旋鈕，使數(shù)字顯示為"100.0T"（如果顯示不到100%T，則可適當(dāng)增加靈敏度的檔數(shù)，同時應(yīng)重復(fù)"3"，調(diào)整儀器的"00.0"）
（7）將被測溶液置于光路中，數(shù)字表上直接讀出被測溶液的透過率（T）值。
（8）吸光度A的測量，參照"3""6"調(diào)整儀器的"00.0"和"100.0"，將選擇開關(guān)置于A旋動吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為.000，然后移入被測溶液，顯示值即為試樣的吸光度A值。
（9）濃度C的測量，選擇開關(guān)由A旋至C，將已標(biāo)定濃度的溶液移入光路，調(diào)節(jié)濃度按鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測溶液移入光路，即可讀出相應(yīng)的濃度值。
（10）儀器在使用時，應(yīng)常參照本操作方法中"3""6"進(jìn)行調(diào)"00.0"和"100.0"的工作。
（11）每臺儀器所配套的比色皿不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)換。
（12）本儀器數(shù)字顯示后背部，帶有外接插座，可輸出模擬信號，插座1腳為正，2腳為負(fù)接地線。
（13）如果大幅度改變測試波長時，需等數(shù)分鐘后才能正常工作。（因波長由長波向短波或短波向長波移動時，光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)較慢，需一段光響應(yīng)平衡時間。
722
型光柵分光光度計的使用步驟
1、開啟電源，指示燈亮，選擇開關(guān)置于“T”，波長調(diào)置使用波長。儀器預(yù)熱20分鐘。
2、打開試樣室蓋（光門自動關(guān)閉），調(diào)節(jié)“0”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”。
蓋上試樣室蓋，將比色皿架處于蒸餾水校正位置，使光電管受光，調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0”。
3、如果顯示不到“100.0”，則可適當(dāng)增加微電流放大器的倍率檔數(shù)，但盡可能倍率置低檔使用，這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。但改變倍率后必須按步驟2重新校正“00.0”和“100%”。
4、預(yù)熱后，按步驟2
連續(xù)幾次調(diào)整“00.0”和“100%”，儀器即可進(jìn)行測定工作。
5、吸光度A的測量：按步驟2 調(diào)整儀器的“00.0”和“100%”，將選擇開置于“A”，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“.000”，然后將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度的值。
6、濃度C 的測量：選擇開關(guān)由“A”旋置“C”，將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測樣品放入光路，即可讀出被測樣品的濃度值。
7、如果大幅度改變測試波長時，在調(diào)整“0.00”和“100%”后稍等片刻（因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“00.0”和“100%”即可工作。
8、每臺儀器所配套的比色皿，不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)換。
分光光度計的基本原理是溶液中的物質(zhì)在光的照射激發(fā)下，產(chǎn)生了對光吸收的效應(yīng)，物質(zhì)對光的吸收是具有選擇性的，各種不同的物質(zhì)都具有其各自的吸收光譜，因此當(dāng)某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系，也即符合于比色原理---比耳定律。
本儀器是可見光分光光度計，其波長范圍為360 nm～800 nm，具有測量被測溶液透光率（T）值，吸光度（A），濃度直讀，模擬信號輸出等功能。分光光度技術(shù)主要是利用物質(zhì)*的吸收光譜來鑒定物質(zhì)性質(zhì)及含量的技術(shù)，其理論依據(jù)是Lambert和Beer定律。
使用方法：
（1）儀器預(yù)熱。打開樣品室蓋（光門自動關(guān)閉）。開啟電源，指示燈亮，儀器預(yù)熱20 min。選擇開關(guān)置于“T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”。
（2）旋動波長手輪，把所需波長對準(zhǔn)刻度線。
（3）將裝有溶液的比色皿放置比色架中，令參比溶液置于光路。
（4）蓋上樣品室蓋，調(diào)節(jié)透光率“100％T”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0T”。（如顯示不到100％T，則可加按一次。
（5）吸光度A的測量：儀器調(diào)T為0和100％后，將選擇開關(guān)轉(zhuǎn)換至A調(diào)零旋鈕，數(shù)字顯示應(yīng)為“.000”。然后拉出拉桿，使被測溶液置入光路，數(shù)字顯示值即為試樣的吸光度A。
（6）測定完畢后，先打開樣品室蓋，再斷電源。比色杯應(yīng)清洗干凈后，再貯放保存。
（7）濃度直讀 按MODE鍵，使CONC批示燈亮，交已標(biāo)定濃度的溶液 移入光路，按下溶液調(diào)節(jié)鍵（↑100％T鍵的↓0％鍵），使數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測溶液移入光路，即讀出相應(yīng)濃度值。
（8）儀器數(shù)字顯示背后，裝有接線柱，按下FUNC鍵，可輸出模擬信號
甲基橙是一種有機(jī)弱酸，在不同PH下發(fā)生結(jié)構(gòu)變化反應(yīng), 它的酸形和堿形具有不同顏色. 在酸性環(huán)境中呈紅色，在堿性環(huán)境中呈橙黃色。用于酸堿滴定的指示劑就應(yīng)知道其zui大吸收波長在不同pH條件下會發(fā)生變化了,
我做過不同PH 值下甲基橙的吸收波長變化圖的與PH值得關(guān)系蠻大的 我一般取PH7時的為464nm顏色變化對波長應(yīng)該沒什么影響的因為濃度小了所以顏色淺了。
怎么測定甲基橙的zui大波長
選定任一濃度的甲基橙溶液于分光光度計中，調(diào)節(jié)其波長，測定其在不同波長下的吸光度，大概范圍在460左右zui大。尋找zui大吸收波長。462左右，選擇zui大吸光度的波長。
